雞腎炎病毒的分離培養

1、細胞培養 ANV不能在鴨胚成纖維細胞或其他已建立的哺乳類細胞系(如Hela、Vero、PK-15和MDCK)中生長。

一般是用雞腎細胞(CKC)進行ANV的培養與增殖，能夠產生細胞病變(CPE)；病料接種已長成單層的細胞，感染後24小時病毒滴度最高，在接種後72小時細胞出現圓細胞型CPE，但不產生包涵體和血凝素。

2、雞胚接種 選擇6日齡的SPF雞胚或無ANV抗體的胚進行卵黃囊接種，感染後3～14天內死亡，雞胚全身性出血、水腫、絨毛尿囊膜肥厚，生長停滯；接種9天以後才死亡的雞胚，其胎兒嚴重發育不良，比正常胎兒要明顯小得多；如果經絨毛尿囊膜突進接種，則胎兒很少發生死亡。病毒分離物能通過50納米微孔濾膜。

3、易感雞接種試驗 對1日齡SPF雛雞用處理過的病料或用胚胎製備的50％組織懸液經腹腔內接種不表現臨床症狀，但生長停滯；而經口腔接種，可在感染後3—7天腎臟出現肉眼可見病變。用特異性的抗ANV熒光抗體染色受感染腎臟組織切片或細胞培養物檢查病毒抗原，可以作為疾病早期診斷的一種手段。