雞胚感染沙雷氏菌的診斷

禽類胚胎疾病是由多種因素及病原微生物引起的綜合性疾病，可造成禽胚的發育受阻，胚胎死亡，孵化率降低等現象，導致養禽業的重大經濟損失。其又可分為內源性感染(由母體直接傳遞病原)和外源性感染(環境中的微生物侵入蛋內)。其中最常見細菌性感染包括了大腸桿菌、沙門氏菌、波氏桿菌、假單胞菌、變形桿菌以及一些球菌等。

最近我們在一批送檢的死亡雞胚中首次分離到一株禽源性粘質沙雷氏菌，通過雞胚的攻毒試驗成功複製出與臨床症狀一致的病變，證明了其對雞胚的致病性，同時為有的放矢地開展防治工作，我們在進行藥敏試驗的同時還對其可能的感染來源進行了調查。

一　臨診調查

雞胚在孵化過程中沒有明顯的死胎率升高現象，死亡主要為落盤後至出殼的這段時間，雞胚常常能夠啄開殼，但很多最終無力出殼；能出殼的雞在飼養的頭幾天內部分表現為食慾不振、精神萎靡、拉黃白色稀糞，同時大群中表現最明顯的是張嘴伸頸、呼吸困難並可聽到呼吸羅音。

二　剖檢變化

對未出殼和出殼後的雞進行剖檢發現，主要的病變集中在氣囊和肺部，氣囊表現為程度不一的混濁和滲出，嚴重病例能夠見到其表面有黃綠色的乾酪樣滲出；肺臟暗紅色，手壓能見到大量的炎性滲出液，嚴重病例有黃白色壞死點。通過臨床調查，發現病原來源於種公雞的精液，通過精液至母雞輸卵管後傳遞至蛋內，當雞胚進行孵化時在胚體內繁殖，但不引起雞胚的死亡。

三　實驗室診斷

將發病死亡雞胚和雛雞的氣囊病科和卵黃囊病科同時接種普通營養瓊脂、麥康凱營養瓊脂和雞鮮血營養瓊脂，37℃培養24小時同時進行支原體的增菌和培養試驗。24小時後能夠在普通培養皿上看到1~2mm大小的菌落(圖1)，呈灰白色半透明，表面光滑，能在麥康凱上生長，不發酵乳糖，菌落呈灰白色，菌落較普通營養瓊脂小。在雞鮮血瓊脂培養基上沒有溶血環出現。美蘭染色呈球狀及球杆狀，革蘭氏染色為陰性，多接近球狀的小桿菌(圖2)。同時進行的支原體培養為陰性。

生化試驗：分離菌能發酵葡萄糖、麥芽糖、甘露糖、蔗糖、纖維二糖、半乳糖、覃糖、果糖、山梨醇、七葉苷、水楊苷，但不產氣；不發酵乳糖、木糖、棉籽糖、阿拉伯糖，衛矛糖、鬆二糖；VP、賴氨酸脫羧酶、鳥氨酸脫羧酶反應陽性；H2S、尿酶、苯丙氨酸脫氯酶反應陰性。

通過上述實驗證明分離菌為粘質沙雷氏菌。

四　藥敏試驗

採用常規藥敏紙片法對分離菌進行藥敏試驗，結果該菌對環丙沙星、左旋氧氟、氟苯尼考高度敏感，對新黴素、丁胺卡那黴素中敏，對頭孢拉定、頭孢噻呋鈉等不敏感。

五　病因調查及防治措施

1　通過臨診調查，發現病菌來源於種公雞的精液，通過精液至母雞輸卵管後傳遞至蛋內，當雞胚進行孵化時在胚體內繁殖，但不引起雞胚的死亡。

2　將分離菌株通過卵黃囊接種10日齡雞胚，雞胚未發生死亡，直至出殼，表現為能琢殼但無力出殼，同時對其剖檢能夠看到與臨診一致的雞胚病變，從氣囊和卵黃囊中再次分離到該菌。

3　粘質沙雷氏菌長期被認為是水和土壤中的常居菌群，近年來才發現其可致人體感染，包括泌尿道、呼吸道、腦膜和傷口感染，可引起菌血症、內毒素休克和心內膜炎。在家禽中的感染報道不是很多。有報道從土壤或水中分離到的粘質沙雷氏菌在有氧，特別是在20℃培養時會產生一種不擴散的紅色色素靈菌紅素，但臨診分離菌株大部分不產色素，我們從禽源分離到的該菌株也未產生色素。

4　預防措施為應對雞群進行藥物淨化，注射氟苯尼考或大群用環丙沙星飲水，進行2～3個療程，同時對種公雞的精液進行無菌檢驗，淘汰帶菌雞。

5　由於該菌對頭孢噻夫鈉存在相當強的抗藥性，所以在雛雞出殼後改變以往注射該藥的規程，改換環丙沙星或氟苯尼考，同時飲水補充電解多維，加強營養吸收，減少應激。