家禽血液採集、儲存及送檢的技術與方法
隨著我國養雞業日益向規模化、集約化方向發展,雞病也呈現出新的特點,如混合感染增多,病症複雜化和非典型化。為了給疾病的預防、控制、淨化提供技術支援,必須執行日常疫病監測制度,在此過程中,雞的血液採集是一項重要的常規性和前提性工作,準確快速的採血技術可以減少雞隻應激,避免造成雞隻不必要的死亡,還可使監測結果更為可靠。血樣的採集看似簡單,但真正操作起來,其難度和強度較大,集專業知識和操作技巧於一體。筆者結合長期的臨床實踐,主要針對與雞採血技術相關的問題進行介紹。
一 主要器材
5mL一次性塑料注射器、試管、試管架、5%碘酊棉球、75%酒精棉球、幹棉球、標籤紙、記號筆、相關表格等。
二 採血前的準備工作
採血人員必須2人以上,需經過專業培訓,熟練掌握取樣技巧,並遵循嚴格的無菌操作規程。獸醫人員到雞場取樣時,要嚴格遵守雞場消毒防疫等相關規定,口罩、乳膠手套、防護帽、防護服、防護鞋穿戴整齊後方可進入現場。
採血的地點和時間應符合要求。採血場所應有充足的光線。夏季室溫最好保持在25℃~28℃,冬季則在1 4℃~20℃。如果雞處於產蛋期間,最好等到下午大部分雞產完蛋後採血,以免應激反應引起產蛋下降。
採血時用的注射器和試管保持清潔乾燥,並且注射器要有足夠的強度、使用靈活且方便可靠、外包裝未破損、在有效期內使用。
三 採血方法
採血方法的選擇,主要取決於採血的目的、所需血樣或血清的數量以及雞的日齡等,視實際情況而定。凡用血量較少的檢驗,如血塗片.可刺破雞冠取血;用中等量血時,可以從靜脈血管採集,如檢測血清中禽流感、新城疫抗體效價;當需血量較多時,可以從心臟採集,如配製雞紅細胞懸液。雛雞可採用跖骨內側靜詠採血法、頸靜詠採血法;青年雞、育成雞比較多的應用翼下靜脈採血法、心臟採血法。
1 雞冠採血法
多用於採血量較少的採血,用針頭刺破雞冠即可。吸取血液時用手擠壓雞冠一次,毛細管可吸取30~80ul血液。此法操作簡便,但採完血後要用濃碘酒塗抹傷口止血,既預防感染,又能制止因出血而引起的啄冠。
2 頸靜脈採血法
雞右側頸靜脈較左側粗,故常採用右側頸靜脈採血。左手以食指和中指夾住雞頭部,並使頭偏向左側,無名指、小指和手掌握住軀幹、拇指輕壓頸椎部以便靜脈充血怒張。常規消毒後,右手持注射器,針頭傾斜45。沿血管方向一側0.3~0.5cm刺人靜詠,再與血管平行進針0.2~0.5cm抽取血液.採血完畢後,壓迫傷口處止血。
3 跖骨內側靜脈採血法
雞跖骨內側靜脈採血法適合於雛雞,其優點是易於保定,血管位置明顯,並且血管遊離性小。
助手一手固定兩翼根部,另一手固定一隻腳,按住跖骨內側的靜詠,此時腳部靜脈突起,常規消毒後,右手持注射器與跖骨面板呈10。順血管方向進針取向。跖骨內側靜脈採血是向心方向,採血時進針角度不能太大,回抽活塞的速度要特別緩慢。
4 翼下靜脈採血法
翼下靜脈採血法是雞的採血方法中最常用的。採血時,最好有助手保定雞。助手左手抓雞的兩隻腳,右手抓雞的兩隻翅膀,將雞側放於地面,並用大拇指壓迫翅膀根部靜脈,使靜詠充分充血,以方便採血操作。採血者用酒精棉球消毒翅靜脈窩區後即可進針,稍稍將針頭輕插進血管,輕拉話塞,注意觀察針筒內有無血液被吸出,當發現有血液開始被吸出時,必須保持注射器位置不動,讓血液緩緩吸人注射器針筒內,達到所需的採血量後,助手用幹棉球壓迫血管上的傷口約30秒止血。
壓迫翅膀根部靜脈血管時,不能用力太大、壓得太緊,否則造成血管充血過分,針頭容易滑出血管。
進針技巧要掌握好。為避免血液直接流出體外造成雞體失血過多,在距離靜脈窩大約0.3cm處,使針管與近心端血管的夾角為45。,進針最好是將針頭的切口面向上,針頭輕挑起表皮,由表皮與肌肉之間的空隙,往血管的遠心端方向推針前行至血管上面,再將針管與血管重疊成一條直線刺入血管。進針不宜過深,如刺穿血管,皮下很快血腫,採血失敗。
要注意針頭方向。在採血中出血順暢,固定針頭不動,輕拉活塞抽血2mI左右。如果發現很快不出血,可將針頭左右旋轉,同時輕拉活塞直到抽出血,防止血管壁吸住針頭,導致血流受阻。
翼下靜脈採血時,抽血速度要保持緩慢,靜詠血管回血流速慢,內壓突然降低易使血管壁接觸針尖而阻塞了針頭,影響採血。
若需要反覆多次採血,應自離心端開始,以免發生栓塞而影響整條靜脈。
翼下靜脈採血前一定要用酒精棉球消毒,酒精有擴張血管作用。採血完畢,要用幹棉球壓迫採血部位,不要用酒精棉球,因為酒精會引起溶血,造成血液凝固不良,不利於止血。
5 心臟採血法
雞心臟採血對心臟有損傷,也易傷及肺臟等其他臟器,引起內臟出血,影響雞的生長髮育,甚至會造成死亡,特別是雛雞,常因針頭刺破心臟和肝臟導致出血過多而死。心臟採血雖然難度大,但是採血速度快、血量多、效率高,適宜於多量血液時使用。雞心臟採血有側臥法和仰臥法。
側臥採血法:助手右手抓住雞雙腿,左手握住兩翅膀,使雞右側臥,左側面向上,放在小桌子上。採血者自龍骨突起前緣引一直線到翅基,再由此中點向髓關節引一直線,此線前1/3和中1/3的交界出有一凹陷,即是心臟採血進針部位。或者尋找由胸骨走向肩胛部的皮下大靜脈,心臟約在該靜脈的分支下側,有時用食指觸控可感覺到心臟跳動。用酒精消毒後,以碘酊標記採血部位。7#針頭刺入時,如觸及胸骨可稍拔出,針頭向右偏一點避開胸骨,再將針頭向裡刺入,邊刺邊抽動活塞,若剌人心臟,便有血液湧入注射器。術畢,區域性消毒。
仰臥採血法:雞仰臥保定,雞頭部朝向採血者,並使頸部及兩腿伸展,拔去胸上部少許羽毛,用手指在胸骨上方,嗉囊下方摸得一凹窩,區域性常規處理,右手持7#針,自胸骨上方凹窩斜向前下方心臟方向,與雞軀體成45。刺入,邊剌邊抽動活塞,若刺入心臟,便有血液湧入注射器。術畢,區域性消毒。雞仰臥採血應在嗉囊空虛時進行,較為方便。
四 雞採血時的注意事項
採血時做好現場記錄,規範填寫採血表格,包括雞場名稱、雞的品種、日齡、樣品數量、免疫情況等專案,每份樣品做好標記,嚴防損失、混淆和汙染。
採血量要根據檢測要求採取。樣品布點應符合代表性、準確性、合理性和科學性的原則,一般一個批次的雞群至少採集15份樣品。採集的樣品應涉及不同的雞舍,同一雞舍的四個角落、中間位置都要採集血樣,這樣才具有說服力。
採血留下的廢棄物,進行集中焚燒或深埋等無害化處理。
五 血液樣品的儲存與送檢
採集到血液後,應立即將針頭拔掉,把注射器內的血液沿著試管壁徐徐注入,不能有氣泡,也不能振盪。逐一編號,仔細核對,傾斜放置。
血液樣品夏天在常溫下,冬天在25℃~37℃溫水中放置1h左Z右,即可析出血清,血清析出後需冷凍儲存。
採集製作雞紅細胞懸液時,5mI注射器裡應先放入2mL抗凝劑,抗凝劑用3.8g檸檬酸三鈉溶於100mL蒸餾水中即可。
血液樣品送檢時,在保溫箱中加適量的冰塊防止血液變質,送檢過程中儘量防止劇烈振盪。