新城疫血凝抑制試驗指導生產應注意的幾個問題

　一　正確認識抗體滴度、保護率與環境條件的關係

實際生產中，養殖環境問題已越來越嚴重，雞體已處於各種病源的重重包圍之中，管理粗放，免疫力低下，加之新城疫毒株的變異，強、中、低毒株共存，就是有100％的免疫保護，對野外強毒也難以得到100％保護。所以在用新城疫血凝抑制試驗(HI)指導生產中，不能光看實驗資料，而要和實際飼養環境情況聯絡起來。特別是對於那些汙：染嚴重的老場，有資料報道，抗體滴度至少要達到10log2以上，才能有較安全的保護。在生產中，養雞場不能將疫苗免疫看作「一苗定神針」的萬全之策，過分依賴疫苗。   

　　二　要重視區域性免疫的作用   

實踐證明，高新城疫HI抗體水平的雞群可能通過呼吸道感染新城疫野毒；相同水平的HI抗體對新城疫保護效果不盡相同，可能就是細胞免疫、黏膜免疫作用的結果。事實上，呼吸道的區域性免疫只有在直接接觸外源性抗原後才能引起免疫應答。據試驗，經氣霧免疫後氣管、支氣管的沖洗物中含有相當高的IgA和IgG，這兩種抗體均能中和病毒，阻止NDV侵入和吸附，從而在呼吸道形成有效的防禦屏障。通過弱毒疫苗氣霧免疫使在氣管黏膜中有IgA去封鎖住病毒入侵大門是非常必要的。所以在生產中，每隔2~3個月定期噴霧接種弱毒疫苗對控制典型和非典型ND是很有必要的。

三　要認真對待母源抗體的影響

在生產中，普遍認為雛雞早期有母源抗體的保護，過早免疫會對新城疫免疫形成干擾，影響免疫效果，所以在制定程式上一般都將早期免疫安排在7～10日齡。這一做法在當前高感染壓力情況下，存在一定的弊端。在養殖環境高汙染區，較高的母源抗體也難以阻止新城疫的發病，早期免疫已成為免疫程式中必不可少的。早期免疫確實會對疫苗免疫產生影響，但主要影響的是體液免疫，對雛雞早期的活苗滴鼻、點眼、氣霧免疫產生的區域性黏膜和細胞免疫影響較少。據用標準強毒株F48E9 106．0ELD50／羽進行攻毒，通過攻毒保護試驗結果表明1日齡免疫效果明顯優於未免疫組。因此在現實高感染的壓力下，儘量把新城疫免疫提前到最初的三天進行，及早在呼吸道等黏膜部位建立起免疫屏障，是很有必要的。

四　對現行標準評價體系的商榷

新城疫血凝抑制試驗(HI)標準規定HI≥510g2時，免疫合格，群體免疫合格率達到70％以上時，就不會出現新城疫大面積流行。這一標準在過去是可行的，但在當前養殖環境普遍惡化，疫情風險加大的背景下，這一標準顯得有點偏低。有試驗表明，在抗體水平較均勻的情況下，在HI抗體高於6log2時，才能使雞在強病毒攻擊時不出現明顯的臨診症狀，但蛋雞的產蛋量仍會嚴重下降；在HI抗體高於8log2時才可避免出現呼吸道症狀並防止雞排出病毒，但蛋雞仍會出現產蛋下降；在HI抗體高於10log2時才可完全防止產蛋下降的現象。所以在生產中，僅僅保證雞群HI抗體合格是不夠的，筆者認為，在重視區域性免疫(弱毒疫苗氣霧或滴眼、滴鼻)的基礎上，適當提高迴圈抗體水平(雛雞階段、產蛋前中期使用油乳劑苗，並適當加大劑量)是有必要的。從群體來說，只關注抗體的平均值也是不夠的，離散度、最低值也很重要，因為抗體高低不一，不均勻整齊的話，病毒通過突破抗體比較低的一部分雞體，感染排毒，造成病毒數量增多，病毒毒力增強，這一放大效應，在一定條件下就可使雞群發病。

五　在檢測中，要儘量減少試驗偏差，保證資料準確

1　取樣要有代表性，樣品質量達標

根據檢測目的，從1日齡測定母源抗體開始，定期取樣監測，早期每隔1～2周監測一次，以後隨日齡增大每3～4周測定一次，取樣時，應注意從不同的位置抓雞，而且要具有足夠的數量和一定代表性，一般萬隻以上雞群按0．5％取樣，小型雞群按1％取樣。只有合理取樣，個體才能反映群體的整體狀況，才能達到檢測的目的。另外血清的儲存、質量也很關鍵，採集的血清要在儘可能短的時間內送達檢測，反覆凍融、腐敗變質、溶血、膠狀化等，都會影響檢測結果。

2　減少實驗室操作影響

新城疫血凝抑制試驗雖然操作簡單，但因環節多、靈敏度高，很容易出現操作上的偏差，誤讀誤判，給生產帶來損失，必須引起注意。如製備紅細胞的雞隻是否受到新城疫感染或合有新城疫抗體；病毒懸液和紅細胞懸液沒有及時搖勻，加入時濃度高低不一；感作最適宜的環境溫度是20～25℃，當溫度過低，出現結果就要慢。環境溫度超過30't2時，試驗結果出現的要快，往往在15分鐘左右就可讀數。一旦時間過長，結果就會消失，或使整板無凝集現象，給人一種誤象；凝集板是否清洗乾淨等等，均可使檢測結果出現很大的偏差。