禽流感滅活疫苗（H9）不同免疫途徑免疫效果的比較

　作者：國林　趙全興　李梅　馬建平　楊欣欣　汪冉　刁有祥

前言：禽流感(Avian Influenza，AI)病。禽類感染後表現為呼吸道症狀、食慾減少、急性高度致死性。自1878年AI首次在義大利流行以來，蔓延迅速，世界大部分國家和地區均相繼有AI發生的記錄和報道，每一次嚴重暴發都給養禽業造成巨大的經濟損失。禽流感沒有特效的藥物治療，因此疫苗免疫是控制本病最有效的方法。本文探討禽流感滅活疫苗不同接種部位的防疫效果，篩選最佳的防疫途徑，以期指導生產實踐。

一　材料與方法

1　試驗動物

1日齡健康海蘭褐蛋雞，購於泰安東嶽種禽有限公司。

2　試驗材料

96孔V型微量反應板、移液器、生理鹽水、1％雞紅細胞懸液。禽流感H9亞型血凝抑制試驗抗原由中國科學院提供；禽流感滅活疫苗(H9亞型)購於乾元浩生物股份有限公司。

3　試驗動物的赴理

600只健康海蘭褐蛋雞根據不同免疫途徑隨機分為A、B、C、D、E五組，每組120只。A組為空白對照、B組為頸部皮下注射、C組為胸部肌肉注射、D組為翅根部肌肉注射、E組為腿部肌肉注射。在45曰齡、95日齡分別注射禽流感滅活疫苗(H9)0.5mL。試驗在相同的環境下，採用同種飼料進行飼餵，同一免疫程式(表1)進行免疫預防，每隔3天隨機選取15只雞翅靜脈採血，分離血清，根據HI法撿測雞的抗體水平，根據平均值繪製抗體消減曲線。

4　抗體水平檢測

慄用血凝(HA)與血凝抑制試驗(HI)(《高致病性禽流感診斷技術》中華人民共和國國家標準GB/T 18936-2003)。

二　結果

不同防疫部位下禽流感(H9)抗體滴度見圖1，

45日齡免疫禽流感H9亞型疫苗後，D組(翅根部肌肉注射)抗體上升速度最快，57目齡達到階段性最高值，為8.2 log2，B組(頸部皮下注射)上升速度最慢，這主要因為肌肉注射，吸收速度比皮下注射快，產生抗體也較快，而皮下注射疫苗吸收緩慢而均勻，產生抗體比較慢；5772日齡，B、C、D、E組抗體水平基本一致，抗體曲線變化相吻合且抗體水平一直維持在61og2以上；72目齡以後，E組(腿部肌肉注射)抗體滴度平均值最高，且E組抗體滴度較其他組高0.5～2.0個滴度，B、C、D組抗體水平比較穩定，均勻度也較好。

三　討論

通過45日齡、95目齡兩次禽流感滅活疫苗的免疫，由H9亞型抗體變化曲線可清楚看出腿肌注射效果最好，抗體滴度比頸部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三種注射方式高；而頸部皮下、胸部肌肉、翅根部肌肉三種注射方式免疫效果基本一致。

綜合分析整個試驗，腿部肌肉注射：禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)；頸部皮下注射：禽流感二價滅活疫苗(H5 H9)、重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(HBNl，Re-4 Re-5株)、禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)；胸肌注射：禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)、傳染性法氏囊炎卵黃抗體；翅根部肌肉注射：重組禽流感病毒H5亞型二價滅活疫苗(H5Nl，Re-4十Re-5株)、禽流感滅活疫苗(H9N2亞型)。由此可看出：除腿部肌肉外，其它防疫部位均注射兩種以上疫苗，而且每個部位吸收疫苗是有限的，防疫頻繁、疫苗劑量過大均會影響疫苗的吸收效果。這就提醒我們在實際操作中，要熟練掌握各種防疫手法，不能因為省時省力而每次都注射在同一部位，不利於疫苗的吸收，從而影響免疫效果。

整個蛋雞的飼養過程中，疫苗免疫需作統籌的安排，儘量不要短期內同一部位重複注射；同～部位油苗的注射應低於3次。